Examinando por Materia "Citotoxicidad"
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Publicación Acceso abierto Apósito de aloe vera para la cicatrización de heridas dérmicas(Universidad EIA, 2014) Céspedes Marulanda, Laura; Correa Cardona, Sarita; Londoño López, Martha ElenaLa reparación y regeneración del tejido lesionado debido a diversos factores como el medio ambiente, quemaduras, alergias, agentes químicos y farmacéuticos ha sido desde la antigüedad un gran desafío para los seres humanos. El hombre ha venido tratando de devolver la morfología, apariencia y funcionalidad a los tejidos lesionados. Para esto, tratamientos como injertos, vendajes, cremas y otros métodos como son los andamios y apósitos han sido ampliamente utilizados. Hoy en día, los apósitos para heridas han sido objeto de estudio para muchos investigadores. Estos, pueden obtenerse naturalmente de insectos, animales marinos y plantas que poseen propiedades antibacteriales, son biocompatibles, hidratantes y activadores de células. Algunos de ellos, como el alginato y el quitosano, cuentan con componentes que pueden ayudar en el proceso de curación. El presente trabajo de investigación, se desarrolló para optimizar la composición del sistema de liberador de medicamentos de Aloe vera, que es ampliamente utilizado por sus propiedades terapéutica, por lo cual, puede ser un material activo en apósitos para heridas. Este sistema ha sido estudiado desde hace unos años en el Laboratorio de Biomateriales, con el principal objetivo de contribuir a la cicatrización de irritaciones y lesiones dérmicas superficiales; buscando obtener un mejor tratamiento que sea biodegradable, no tóxico y antibacterial. También se realizaron estudios morfológicos por medio de la microscopia electrónica de barrido (SEM) y análisis estructural de la composición de cada matriz con microscopía infrarroja de la transformada de Fourier. El desarrollo del sistema polimérico se realizó con alginato y quitosano. Se obtuvieron matrices que absorben Aloe vera y lo liberan de manera controlada. El proceso de obtención se mejoró utilizando diferentes concentraciones de las soluciones y empleando entrecruzantes físicos como el ultrasonido y el secado en frío con equipo de liofilización, entrecruzantes químicos, como el cloruro de sodio, y agente porogénico. Sin embargo, no todas las matrices presentaron las propiedades adecuadas, por lo cual, se seleccionaron cinco tratamientos para realizar los análisis. Además, se diseñó el soporte que llevaría la matriz para fácil manipulación por el usuario o paciente. Los apósitos de alginato/quitosano y Aloe vera mostraron tasas de degradación satisfactorias, buena capacidad de hinchamiento, capacidad antibacterial con Staphylococus aureus y compatibilidad. Se presentó potencial actividad antibacterial en las matrices cargadas con Aloe vera y ensayos in vitro demostraron buena biocompatibilidad.Publicación Sólo datos Descelularización de intestino animal para promover recelularización epidérmica(Universidad EIA, 2019) Vega Giraldo, Paula; Londoño Peláez, CarolinaLa piel es el órgano más grande del cuerpo, pero a la vez es el que está más expuesto en todo momento a que algo malo le pase. Las quemaduras son uno de los accidentes más comunes y cuando son de tercer grado pueden llegar a ser fatales para las personas. La falta de técnicas para regeneración de la piel o para obtener injertos de una manera más eficaz, ha causado que, según la OMS, las quemaduras ocasionen aproximadamente 180.000 muertes al año en el mundo. Los injertos de piel que se utilizan actualmente pueden tener un proceso muy lento y pueden afectar la recuperación del paciente a la hora de tener que pasar por otro proceso de cicatrización. Es por lo anterior, que se propone evaluar un protocolo para la descelularización de intestino animal para la conformación de una matriz que promueva la recelularización epidérmica para crear un nuevo tipo de injertos de piel que sea más eficaz y con menos secuelas para los pacientes. Estos nuevos injertos se basarán en los bioscaffolds, que están siendo estudiados y caracterizados por algunos investigadores en el mundo. Estos son materiales andamio o de soporte y como carecen de componentes celulares y mantienen la matriz extracelular, son "sin rechazo" cuando se implantan, y son capaces de actuar como una plantilla inductiva para la recelularización. El tejido será sometido a procedimientos como enjuagues con solución salina tamponada, antibióticos, entre otros. Se eliminarán componentes del tejido como residuos celulares, membranas celulares, ADN celular, proteínas, lípidos, colesterol, entre otros. Después de estos procedimientos se obtendrá una matriz acelular en la que se evaluará la proliferación de células de hámster chino por medio de diferentes tinciones. El protocolo de descelularización fue establecido y realizado con éxito, sin embargo, el tejido descelularizado obtenido no se pudo caracterizar por completo debido a que la tinción con hematoxilina y eosina no brinda la información suficiente para determinar el porcentaje de células que se removieron de la matriz, por lo que se propone realizar diferentes ensayos. El análisis de citotoxicidad arrojó resultados positivos, ya que las matrices no resultaron siendo tóxicas y permitieron que las células proliferaran correctamente. Además, se observó con histología que las células cultivadas en las matrices presentaron una buena adhesión. Se propone utilizar métodos cuantitativos para comprobar la descelularización del tejido, sin embargo, el presente estudio brinda un indicio de las buenas propiedades que tienen los andamios de SIS para la adhesión y proliferación de células, y que, para un futuro, pueden ser una de las mejores opciones para realizar injertos de piel.Publicación Acceso abierto Estudio descriptivo de las técnicas para la evaluación del efecto genotóxico y citotóxico de biomateriales in vitro(Universidad EIA, 2005) Posada Estefan, Olga Maria; López, Luis ErnestoCon el fin de recopilar la información relacionada con la evaluación de la biocompatibilidad de biomateriales, se realizó una revisión de literatura y se seleccionaron los protocolos de las técnicas más utilizadas. La literatura relacionada con los estudios de biocompatibilidad de biomateriales se encuentra muy fragmentada y no existen manuales de fácil acceso en la lengua castellana; por esta razón, se vio la necesidad de compilar la información disponible en artículos de publicaciones internacionales, y de esta manera crear una guía de consulta rápida que facilite la implementación pruebas in vitro para evaluar citotoxicidad y genotoxicidad. La información aquí compilada describe generalidades como el origen, el principio y las aplicaciones, de cada una de las pruebas revisadas. Éstas son: ensayos para evaluar viabilidad con colorantes vitales, ensayos de contacto directo y metabólicos con MTT para evaluar citotoxicidad; y para evaluar genotoxicidad: el ensayo de Ames, la prueba de aberraciones cromosómicas, la prueba de intercambio de cromátidas hermanas y el ensayo cometa. Los protocolos de estas pruebas describen cada uno de los pasos a seguir, los biomateriales y los equipos que se necesitan para su implementación. Además, se mencionan las normas y regulaciones que se deben tener en cuenta a la hora de emplear dichas pruebas, permitiendo un acercamiento a las técnicas más empleadas a nivel mundial.Publicación Acceso abierto Estudio experimental sobre los posibles efectos citotóxicos y genotóxicos in vitro del hidróxido de calcio(Universidad EIA, 2005) Echeverri Cuartas, Claudia Elena; Velásquez Puerta, Diego Alejandro; López Rojas, Luis ErnestoEl hidróxido de calcio es una material que ha sido empleado en la endodoncia por tener una excelente actividad antimicrobiana y un efecto curativo de la pulpa. Por esta razón existen diferentes presentaciones de este material de acuerdo a la aplicación específica y al efecto deseado. Para la validación de cualquier material se deben desarrollar pruebas in vitro, cuyo resultado demuestre de una forma aproximada los posibles efectos del material. Los ensayos cometa y con MTT son pruebas que permiten determinar de manera precisa y económica la genotoxicidad y la citotoxicidad respectivamente, valiéndose de cultivos celulares expuestos a un agente a evaluar. De manera más específica el ensayo cometa identifica los daños de la cadena sencilla y doble del DNA, mientras que el ensayo con MTT evalúa el metabolismo y la actividad enzimática de la célula viva. En el presente trabajo se evaluó el potencial efecto citotóxico y genotóxico del hidróxido de calcio producido por la compañía New Stetic, comparado con los producidos por las empresas Kerr (Life®) y Dentsply (Dycal®), las cuales son marcas ampliamente reconocidas y estudiadas en el campo endodóntico. Para lo cual se estandarizaron los protocolos de los ensayos con MTT y Cometa. Se realizó una revisión sobre las metodologías utilizadas para la evaluación de la biocompatibilidad de materiales utilizados en odontología, con énfasis en el hidróxido de calcio, adoptando las sugerencias de la literatura internacional, con el fin de cumplir los objetivos propuestos. Se encontró que el hidróxido de calcio producido por New Stetic, presenta un menor efecto citotóxico y un efecto genotóxico mayor que las demás marcas evaluadas, pero no lo suficiente como para considerar que este material es altamente genotóxico.Publicación Acceso abierto Evaluacion de Nanoparticulas Basadas en Complejos de Coordinacion de Quitosano-Fe3+ en Esferiodes Celulares(Universidad EIA, 2022) González Vélez, Sara; Franco Rico, María Isabel; Osorio Osorno, Yuliana Andrea; Echeverri Cuartas, Claudia Elena; Toro, LenkaRESUMEN: El cáncer es una enfermedad reconocida como una de las principales causas de muerte en el mundo, y su tratamiento representa uno de los principales desafíos para la medicina contemporánea. En los últimos años se ha incrementado la implementación de la nanotecnología como una posible terapia, ya que aquellas existentes son generalizadas y se reducen, en su mayoría, a cirugías, radioterapia o terapias sistémicas como la quimioterapia e inmunoterapia. En muchos estudios se llevan a cabo ensayos in vitro para evaluar la efectividad de nuevos medicamentos o terapias dirigidas diseñadas para la eliminación de las células cancerígenas, lo cual se realiza, en su mayoría, en cultivos celulares en 2D. Este tipo de cultivos no simulan las condiciones reales, ya que los tumores son tridimensionales, es por esto que, para solventar esta limitación, se han empezado a usar los cultivos en 3D como los esferoides, donde se aprovecha la tendencia natural de agregación de las células entre sí para formar masas, como sucedería in vivo, y se convierten en un mejor modelo de prueba para ensayos terapéuticos. Por lo anterior, en este trabajo, se propuso establecer un modelo in vitro de evaluación del efecto citotóxico generado por nanopartículas basadas en complejos de coordinación de quitosano-Fe3+, a partir de esferoides de una línea celular de fibroblastos NIH3T3 y la medición de la citotoxicidad generada. Para obtener las nanopartículas fue necesario realizar titulaciones de hierro y tripolifosfato de sodio, con el propósito de encontrar la cantidad idónea a agregar a la solución de quitosano para así garantizar la obtención de nanopartículas con tamaños inferiores a 200 nm y con un índice de polidispersidad menor a 0,3. Luego, se estandarizó la formación de los esferoides celulares con el método “hanging drops” o gotas colgantes, donde se determinó que 3.000 células cada 27µL era la concentración ideal por gota para formar esferoides de aproximadamente 200 µm de diámetro. Las nanopartículas se diluyeron en medio de cultivo suplementado con suero fetal bovino (FBS) y sin suplementar, a diferentes concentraciones, y se pusieron en los pozos con los esferoides durante 24 horas. Se encontró que a partir de concentraciones del 50 % de nanopartículas, los esferoides empiezan a perder actividad metabólica y reducir su diámetro. También se probaron las diferentes concentraciones de nanopartículas en cultivos 2D, para comparar los resultados con aquellos obtenidos con los esferoides. De lo anterior se encontró que los ensayos en cultivos 2D tienden a ser muy variables, y se alejan más de lo que sucedería realmente en condiciones biológicas normales, la cual se simula de una mejor manera con los esferoides.
