Examinando por Materia "Criopreservación"

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    PublicaciónAcceso abierto
    Dental pulp stem cells extraction, culture and cryopreservation protocol
    (Universidad EIA, 2020) Cuadros Herrón, Alejandra; Puerta Mejía, Valentina; Toro, Lenka
    RESUMEN: Durante las últimas décadas se ha evidenciado una creciente demanda de células madre, tanto para su investigación como para sus potenciales aplicaciones. Las células madre son altamente importantes en la ingeniería de tejidos y en la medicina regenerativa gracias a su capacidad de autorrenovarse y diferenciarse según su ubicación o su potencial. Estas células constituyen la base de la biología moderna y gracias a los estudios que se han venido haciendo con ellas se ha logrado cerrar la brecha existente en esta área del conocimiento. La implementación de estas células es vital para mejorar la salud, calidad y esperanza de vida de la humanidad debido a que son pieza fundamental para el tratamiento de enfermedades isquémicas, degenerativas y diferentes traumas. Gracias al impacto que ha causado el uso de estas células en la medicina regenerativa actual y el aumento en sus aplicaciones se ha visto necesario contar con biobancos, repositorios biológicos específicos para estas células y allí poder almacenarlas para su posterior uso con fines investigativos. La función mencionada anteriormente de las células madre en la medicina regenerativa y la ingeniería de tejidos sirve como motivo para implementar un biobanco en la Universidad EIA en el cual se puedan almacenar las células que serán previamente extraídas de pulpa dental (considerado material de descarte), cultivadas y criopreservadas para poder llevar a cabo las diferentes investigaciones que se requieran para dichas áreas en esta institución. El objetivo principal de este proyecto fue diseñar protocolos específicos de extracción, cultivo y criopreservación de las células madre de la pulpa dental para poder establecer una metodología estándar y así poder garantizar resultados óptimos, y constatar el adecuado funcionamiento del biobanco y la viabilidad de las células manipuladas. Se eligieron las mejores condiciones de cultivo, incluyendo 1% ATB + 10% DMSO + DMEM y se evaluó la viabilidad de las células, y se obtuvo una viabilidad máxima de 99.1%. Luego, las DPSCs fueron congeladas bajo 2 condiciones diferentes, 10% DMSO y 10% Glicerol durante 1 y 2 meses, se evalúo la viabilidad después de la criopreservación y se observó que la muestra que mejor porcentaje de viabilidad mostró fue la que estaba sometida a 10%DMS y 1 mes de congelación.
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    PublicaciónAcceso abierto
    Obtención y crio preservación de células madre a partir de cordón umbilical
    (Universidad EIA, 2009) López Álvarez, Sara María; Pineda Molina, Catalina
    El cuerpo alberga diferentes tipos de células madre (stem cells, SCs) que son capaces de regenerar diversos tipos celulares especializados. En particular, las células madre mesenquimales (mesenchymal stem cells, MSCs), tienen la habilidad de diferenciarse en varios tejidos mesenquimales, como el osteogénico, el adipogénico, el condrogénico, el miogénico y el cardiomiogénico. El cordón umbilical humano y la sangre de cordón umbilical –considerados desechos quirúrgicos después del parto-, son actualmente atractivos por ser una rica fuente de MSCs, de fácil obtención y que no presenta ningún reparo ético. Es así como han surgido bancos de criopreservación de este tipo de células, para ofrecer a los donantes una fuente de células viables para tratamientos de futuras enfermedades. Hoy en día, el interés se ha centrado en la generación de bancos públicos de células madre a partir de cordones umbilicales (human umbilical cord stem cells, HUCSCs) o de su sangre (human umbilical cord blood stem cells, HUCBSCs), en los cuales las células criopreservadas por un donante pueden ser utilizadas en el futuro por cualquier receptor que las requiera, no necesariamente miembro de la familia. Con el propósito de evaluar la factibilidad de crear un banco de este tipo de células en la ciudad de Medellín, en el presente estudio se buscó obtener HUCSCs y HUCBSCs, cultivarlas y criopreservarlas, para determinar la viabilidad de las células y su posible posterior uso en el tratamiento de algunas enfermedades. El proyecto fue desarrollado a partir del convenio Escuela de Ingeniería de Antioquia (EIA) - Universidad CES - Hospital General de Medellín Luz Castro de Gutiérrez (HGM). Las muestras fueron procesadas en el Laboratorio de Cultivo Tisular CES-EIA. Para la obtención, se utilizaron diferentes técnicas como: la digestión enzimática del tejido con colagenasa tipo II, cultivo de sangre completa y, separación y aislamiento de células mononucleares mediante la centrifugación por gradiente de densidad, utilizando medio de separación de linfocitos (lymphocyte separation medium, LSM). Para la criopreservación, se utilizó dimetilsulfóxido (dimethylsulfoxide, DMSO), y para la evaluación de la viabilidad, azul de tripano. Los resultados obtenidos, indican que es posible criopreservar a corto plazo HUCSCs, aunque en el proceso se presente una notable pérdida luego de que estas células son descongeladas, afectando la proliferación al cultivarlas nuevamente